新生兒 ＡＢＯ 溶血病（ＡＢＯ－ＨＤＮ）是母體受到胎 兒紅細胞抗原刺激而產生ＩｇＧ 類血型抗體，該抗體可 以通過胎盤屏障進入胎兒的體內，致敏胎兒的紅細 胞，并被胎兒的單核巨噬系統處理，從而引起胎兒或 新生兒紅細胞被破壞而導致免疫性溶血。在我國， 母嬰 ＡＢＯ 血型系統不合占比較高。因此，孕婦產前 檢查ＩｇＧ 血型抗體效價，并分析其與新生兒溶血病 （ＨＤＮ）的發病率關系，是早期預防及后期輔助診斷 ＡＢＯ－ＨＤＮ 的有效方法。本研究通過對入組的５６ 例 Ｏ 型 Ｒｈ（Ｄ）陽性孕婦進行產前ＩｇＧ 血型抗體效價 檢測，對其分娩后的新生兒進行 ＡＢＯ－ＨＤＮ３項的檢 測，探討孕婦產前ＩｇＧ 血型抗體效價與 ＡＢＯ－ＨＤＮ 發 生率之間的關系，現將結果報道如下。

１ 資料與方法

１．１ 一般資料

隨機選取本院婦產科門診產檢的５６ 例 Ｏ 型 Ｒｈ（Ｄ）陽性孕婦，年齡２２～３６歲，中位年齡 ３２歲；孕期２１～２５周，中位孕期２３周。納入標準：本 院產科門診產檢，身體健康，孕 期 未 見 異 常 的 孕 婦。 排除標準：產前不規則抗體陽性、患有自身免疫性溶 血性疾病或其他原因導致的各種溶血性疾病、有輸血 史等。孕婦均進行第一次產前 ＡＢＯ 血型抗體效價檢 測，記錄相關參數，包括孕婦 ＡＢＯ 血型、ＩｇＧ 血型抗 體效價、不規則抗體、血常規等。

１．２ 試劑

ＡＢＯ 反定型用紅細胞及抗 Ａ、抗 Ｂ、抗 Ｄ 標準血清、不規則抗體檢測試劑、２－巰基乙醇（２－Ｍｅ） 均為上海血液生物醫藥有限責任公司生產；ＡＢＯ 血 型卡、抗人球蛋白微柱凝膠檢測卡均為長春博訊生物 技術有限責任公司生產。

１．３ 方法

１．３．１ 抗體效價檢測

采集孕婦產前靜脈血液標 本，進行血常規、ＡＢＯ 血型、不規則抗體及ＩｇＧ 血型 抗體效價檢測。血常規檢測采用 Ｓｙｓｍｅｘ－ＸＮ９０００全 自動血細胞分析儀檢測；ＡＢＯ 血型鑒定采用２次復 核方式，第１次用微柱凝膠卡法作正反定型確定孕婦 血型，第２次使用抗 Ａ、抗 Ｂ、抗 Ｄ 標準血清及 ＡＢＯ 反定型用紅細胞，采用試管法作正反定型復核孕婦血 型。不規則抗體試驗：采用博迅抗人球蛋白微柱凝膠 卡按試劑盒說明書操作。孕婦產前ＩｇＧ 血型抗體效 價試驗：采用抗人球蛋白微柱凝膠卡法按照２－Ｍｅ試 劑說明書操作，具體分３個步驟進行試驗，第１步將 孕婦血清與２－Ｍｅ按照１∶２、１∶４、１∶８、１∶１６、１∶３２、 １∶６４、１∶１２８、１∶２５６、１∶５１２、１∶１０２４的比例在標 記好的試管內稀釋；第２步將稀釋液放置３７ ℃恒溫水 浴箱１５ｍｉｎ進行ＩｇＭ 抗體裂解操作（裂解后溶液需 用 ＡＢＯ 反定型用紅細胞溶液驗證裂解是否完全，若未完全裂解需用０．９％氯化鈉溶液稀釋下一個比例重 新裂解，裂解后重復第２個步驟）；第３步用裂解后溶 液與０．８％的 Ａ 型或Ｂ型反定型用紅細胞溶液按照１ ∶１比例加入抗人球蛋白微柱凝膠卡中進行孕婦產前 抗體效價檢測。

１．３．２ ＡＢＯ－ＨＤＮ３項檢測

用微柱凝膠卡法對新 生兒血型及 ＡＢＯ－ＨＤＮ３項檢測，其中包括間接抗人 球蛋白試驗（ＩＡＴ）、直接抗人球蛋白試驗（ＤＡＴ）、抗 體釋放試驗。ＩＡＴ 及 ＤＡＴ 兩項試驗按照抗人球蛋 白卡試劑說明書進行操作；抗體釋放試驗分 ３ 個步 驟：第１步用生理鹽水洗滌壓積紅細胞３～５次（洗滌 末次吸出上清液，作抗體釋放試驗的陰性對照，以驗 證洗滌是否充分）；第２步加入等體積的生理鹽水充 分混勻后置５６ ℃水浴箱１０ｍｉｎ；第３步離心后取出 上清液（即放散液）加入抗人球卡并加入洗滌末次的 上清液作為陰性對照，進行抗體檢測。

１．４ 結果判斷

ＡＢＯ－ＨＤＮ 的診斷包括以下幾點： 母嬰血型不同、ＤＡＴ、ＩＡＴ 和抗體釋放試驗的結果。 以抗體釋放試驗陽性為診斷標準，結合新生兒血紅蛋 白、膽 紅 素 水 平 等 臨 床 數 據 及 其 臨 床 癥 狀 來 診 斷 ＡＢＯ－ＨＤＮ。見表１。

１．５ 統計學處理

采用 ＳＰＳＳ２０．０軟件對數據進行 分析。計數資料采用百分數表示，組間比較采用χ ２ 檢驗。以Ｐ＜０．０５為差異有統計學意義。

２ 結 果

結果顯示，５６例 Ｏ 型 Ｒｈ（Ｄ）陽性孕婦產前抗體效價以低效價為主， ９０．７％的孕婦抗體效價在１∶２５６以下，其中，５０．０％ 的孕婦抗體效價≤１∶６４，抗體效價＜１∶６４的患者占 ２５．９％，抗體效價為１∶６４的患者占２４．１％。抗體效 價為１∶１２８的患者占１８．５％，抗體效價為１∶２５６的 患者 占 ２２．２％，抗 體 效 價 ≥１∶５１２ 僅 占 總 數 的 ９．３％。以孕婦產前ＩｇＧ 血型抗體效價１∶６４作為界值， 將入組的孕婦按照參考值分為兩組。結果顯示，產前 ＩｇＧ 血型抗體效價≥１∶６４組 ＡＢＯ－ＨＤＮ 陽性檢出 率高于產前效價＜１∶６４組（Ｐ＝０．０２）。產前抗體效 價＜１∶６４、１∶６４、１∶１２８、１∶２５６、≥１∶５１２ 的 ＡＢＯ－ＨＤＮ 檢 出 率 分 別 為５６．３％、６９．２％、９０．０％、 ９１．７％、１００．０％。對５６例新 生兒按 ＡＢＯ 血型進行分組，Ａ 型新生兒 ＡＢＯ－ＨＤＮ 陽性率為７２．７％，Ｂ型 ＡＢＯ－ＨＤＮ 陽性率為７９．４％， Ｂ型新生兒 ＡＢＯ－ＨＤＮ 陽性率高于 Ａ 型，但差異無統 計學意義（Ｐ＝０．５６）。進一步研究分析發現，在ＩｇＧ 血型抗體 ＜１∶６４ 和 １∶６４ 的孕婦中，Ｂ 型 新 生 兒 ＡＢＯ－ＨＤＮ 檢出率高于 Ａ 型，但差異無統計學意義 （Ｐ＞０．０５）；在ＩｇＧ 血型抗體１∶１２８和１∶２５６孕婦 中，Ａ 型新生兒 ＡＢＯ－ＨＤＮ 檢出率則高于 Ｂ 型，差異 有統計學意義（Ｐ＜０．０５）。ＩｇＧ 血型抗體≥１∶５１２的 孕婦中，Ａ 型新生兒與Ｂ型新生兒 ＡＢＯ－ＨＤＮ 檢出率 差異無統計學意義（Ｐ＞０．０５）。

３ 討 論 　　

上海博迅通過動態監測孕婦產前ＩｇＧ 血型抗體效價水平對預 防 ＡＢＯ－ＨＤＮ 發生有著重要意義。胎兒紅細胞抗 原免疫母體產生的ＩｇＧ 血型抗體能通過胎盤屏障與 胎兒的紅細胞血型抗原相結合，分娩后，容易引起新生兒發生肝脾腫大、膽紅素腦病甚至死亡等溶血病特 征，嚴重威脅新生兒的健康乃至生命安全。因此， 對孕婦進行產前ＩｇＧ 血型抗體效價檢測，可以判斷孕 婦血中是否存在ＩｇＧ 類血型抗體，從而有效地預防 ＡＢＯ－ＨＤＮ。 本次研究通過對入組的５６例 Ｏ 型 Ｒｈ（Ｄ）陽性的 孕婦進行產前ＩｇＧ 血型抗體效價檢測，并對孕婦分娩 后的新生兒進行 ＤＡＴ、ＩＡＴ 及抗體釋放試驗的檢測， 通過收集孕婦產前血型抗體效價結果及 ＡＢＯ－ＨＤＮ３ 項試驗結果來判斷 ＡＢＯ－ＨＤＮ 的發生情況，研究結果 顯示，５０．０％的孕婦產前抗體效價≤１∶６４，這提示在 日常檢測中應該注意預防漏檢低效價的樣本。由此 可見，設定孕婦產前抗體參考值，對預測 ＡＢＯ－ＨＤＮ 的價值意義重大。